大家都知道,培養(yǎng)基是供微生物生長、繁殖、代謝的混合養(yǎng)料。由于微生物具有不同的營養(yǎng)類型,對營養(yǎng)物質的要求也各不相同,加之實驗和研究的目的不同,所以 培養(yǎng)基的種類很多,使用的原料也各有差異。為了達到實驗和研究的目的,要按照培養(yǎng)基的配方進行配制。而任何一種培養(yǎng)基一經(jīng)制成就應及時徹底滅菌,以備純培 養(yǎng)用。一般培養(yǎng)基的滅菌采用高壓蒸汽滅菌。那么培養(yǎng)基配好后為什么必須立即滅菌?
發(fā)酵過程中,培養(yǎng)基滅菌主要有以下幾個原因:如不滅菌,會使生物反應的基質或產(chǎn)物,因雜菌的消耗而損失,造成生產(chǎn)能力的下降;雜菌也會產(chǎn)生代謝產(chǎn)物,這 就使產(chǎn)物的提取更加困難,造成得率降低,產(chǎn)品質量下降;雜菌大量繁殖后,會改變反應液的pH值,使反應異常;有些雜菌會分解產(chǎn)物,使生產(chǎn)失敗;如果發(fā)生噬 菌體污染,生產(chǎn)菌細胞將被裂解,使生產(chǎn)失敗。
培養(yǎng)基滅菌是殺滅培養(yǎng)基中本身的原著菌或在空氣中附著的雜菌,更好的讓目標菌生長(減少雜菌消耗培養(yǎng)基中的營養(yǎng),而且有些雜菌會抑制你目標菌的生長)。
一般人工培養(yǎng)菌基本上是盡可能讓其生長快速或者產(chǎn)生代謝產(chǎn)物,因此就讓其在最適培養(yǎng)基上生長,以減少培養(yǎng)時間與提高經(jīng)濟效益。
培養(yǎng)基的滅菌效果檢查方法
將培養(yǎng)基放在將要做實驗的溫箱中進行培養(yǎng)(時間與培養(yǎng)實驗一致,一般是24小時)看滅菌后培養(yǎng)基的菌落就可以判斷。有時也為了使用培養(yǎng)更加科學,在做細菌培養(yǎng)時,除在在涂上需要培養(yǎng)的菌種外,同時另外加一個培養(yǎng)基(空白)同時進行同條件培養(yǎng)進行對比。
培養(yǎng)基配置好后如果存放時間較長而不進行滅菌操作,那么培養(yǎng)基內的微生物就會在其中發(fā)酵生長從而破壞培養(yǎng)基內的營養(yǎng)成分,并且這些微生物的生長過程中會分泌一些毒素從而會抑制目標培養(yǎng)菌的生長。
另外,可以滅菌結束后將培養(yǎng)基放置在培養(yǎng)箱內2~3天,如觀察培養(yǎng)基無任何變化(無菌落生長)即說明已達到無菌狀態(tài)。
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